የኤሊሳ ኪት በጠንካራ አንቲጂን ወይም ፀረ እንግዳ አካል እና አንቲጂን ወይም አንቲባዲ ኢንዛይም መለያ ላይ የተመሰረተ ነው። ከጠጣር ተሸካሚው ገጽ ጋር የተቆራኘው አንቲጂን ወይም ፀረ እንግዳ አካል አሁንም የበሽታ መከላከያ እንቅስቃሴውን እንደያዘ ይቆያል፣ እና አንቲጂን ወይም አንቲቦዲ የተለጠፈው ኢንዛይም የበሽታ መከላከያ እንቅስቃሴውን እና የኢንዛይም እንቅስቃሴውን እንደያዘ ይቆያል። በሚወስኑበት ጊዜ በምርመራው ላይ ያለው ናሙና (አንቲጂኑ ወይም አንቲጂን የሚለካበት) በጠንካራ ተሸካሚው ገጽ ላይ ካለው አንቲጂን ወይም ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ምላሽ ይሰጣል። በጠንካራው ተሸካሚ ላይ የተፈጠረው አንቲጂን-አንቲቦይድ ስብስብ በፈሳሽ ውስጥ ከሚገኙ ሌሎች ንጥረ ነገሮች ተለይቷል.
የኢንዛይም ምልክት የተደረገባቸው አንቲጂኖች ወይም ፀረ እንግዳ አካላት ተጨምረዋል፣ እነሱም በምላሽ ከጠንካራው ተሸካሚ ጋር ይጣመራሉ። በዚህ ጊዜ በጠንካራው ክፍል ውስጥ ያለው የኢንዛይም መጠን በንድፍ ውስጥ ካለው ንጥረ ነገር መጠን ጋር ተመጣጣኝ ነው. የኢንዛይም ምላሹን ንጥረ ነገር ከጨመረ በኋላ ፣ ንጣፉ በ ኢንዛይም ካታላይዜሽን ወደ ባለቀለም ምርቶች ይሆናል። የምርቱ መጠን በቀጥታ ከተሞከረው ንጥረ ነገር መጠን ጋር በቀጥታ የተያያዘ ነው, ስለዚህ በጥራት ወይም በመጠን ትንታኔ እንደ ቀለሙ ጥልቀት ሊደረግ ይችላል.
የኢንዛይሞች ከፍተኛ የካታሊቲክ ቅልጥፍና በተዘዋዋሪ የበሽታ መከላከልን ውጤት ያጠናክራል ፣ ይህም ምርመራው በጣም ስሜታዊ ያደርገዋል። ELISA አንቲጂኖችን ለመወሰን ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል, ነገር ግን ፀረ እንግዳ አካላትን ለመወሰን ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል.
የ ELISA ኪት መሰረታዊ መርሆች
ነገሩን ከኤንዛይም ጋር ለማገናኘት የተለየ የአንቲጂን እና ፀረ እንግዳ ምላሽ ይጠቀማል፣ እና ከዚያም በ ኢንዛይም እና በስብስትሬት መካከል ለቁጥር መወሰን የቀለም ምላሽ ይፈጥራል። የመለኪያው ነገር ፀረ እንግዳ አካላት ወይም አንቲጂን ሊሆን ይችላል.
በዚህ የመወሰን ዘዴ ውስጥ አስፈላጊ ሶስት ሬጀንቶች አሉ-
â ድፍን ደረጃ አንቲጂን ወይም ፀረ እንግዳ አካላት (የበሽታ መከላከያ ማስታወቂያ)
â¡ ኢንዛይም ምልክት የተደረገበት አንቲጂን ወይም ፀረ እንግዳ አካል (ማርከር)
⢠የኢንዛይም እርምጃ (የቀለም ልማት ወኪል) ምትክ
በመለኪያ ውስጥ፣ አንቲጂን (አንቲጂን) በመጀመሪያ ከጠንካራ ተሸካሚው ጋር የተቆራኘ ነው፣ ነገር ግን አሁንም የመከላከል ተግባራቱን እንደያዘ ይቆያል፣ በመቀጠልም ፀረ እንግዳ አካላት (አንቲጂን) እና ኢንዛይም conjugate (ማርከር) ተጨምሯል ፣ ይህም አሁንም የመጀመሪያውን የበሽታ መከላከያ እንቅስቃሴ እና ኢንዛይም ይይዛል። እንቅስቃሴ. ኮንጁጌቱ በጠንካራ ተሸካሚው ላይ ካለው አንቲጂን (አንቲጂን) ጋር ምላሽ ሲሰጥ, ተመጣጣኝ የኢንዛይም ንጥረ ነገር ይጨመራል. ያም ማለት ካታሊቲክ ሃይድሮሊሲስ ወይም REDOX ምላሽ እና ቀለም.
የሚያመነጨው ቀለም ጥላ ከሚለካው አንቲጂን (አንቲጂን) መጠን ጋር ተመጣጣኝ ነው. ይህ ባለቀለም ምርት በአይን፣ በጨረር ማይክሮስኮፕ፣ በኤሌክትሮን ማይክሮስኮፕ፣ በስፔክትሮፎቶሜትር (ኢንዛይም መለያ መሳሪያ) ሊለካ ይችላል። ዘዴው ቀላል, ምቹ, ፈጣን እና የተለየ ነው.